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請教ANNEXIN V-PI法檢測細胞雕亡的原理和使用相關試劑盒的步驟。

BIODAI廣泛用於檢測Annexin -PI雕亡細胞5min,具體步驟如下:1)懸浮細胞:300g,4℃離心5min,收集細胞。貼壁細胞:用不含EDTA的胰蛋白酶消化,300g,4℃離心5min,收集細胞。胰酶消化時間不宜過長(見註意事項),以防假陽性。2)用預冷的PBS洗滌細胞兩次,每次在300g和4℃離心5分鐘,收集1-5×105個細胞。註意:清洗細胞時,盡量避免損傷細胞。3)加100?l 1×結合緩沖液重懸細胞。4)加5?蘭新v-FITC和5?L PI,輕輕攪拌。5)避光,室溫反應10 min。6)加入400?L 1 x結合緩沖液,混勻,樣品在1小時內用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。
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